Comencemos el aislamiento!!!

Para el aislamiento se requiere de medio de cultivo Agar con Manitol, extracto de levadura y Rojo Congo y la composición del medio se indica a continuación:

K2HPO4, 0,5 g
· MgSO4. 7
· H2O, 0,2 g
· NaCl 0.1 g
· extracto de levadura Difco, 1 g
· Manitol, 10 g; Agar 15 g; para 1.000 cc. de agua destilada.

      Según la norma oficial, NOM- 065- SSA1-1993 que establece las especificaciones sanitarias de los medios de cultivo.

      Clasifica al medio de cultivo utilizado para este aislamiento por su aspecto físico como un medio solido que se utiliza para obtener y mantener colonias aisladas de microorganismos.

   

    Así como por su uso  en un medio selectivo por que contener sustancias que impiden el desarrollo de otros microorganismos para permitir el aislamiento de el microorganismo de interés.

Una vez en el laboratorio en condiciones de esterilidad, debe aplanarse el nódulo en 0,5 mL de agua destilada y la suspensión obtenida se sembró con la técnica de estría masiva en 2 cajas Petri con Agar-Manitol-Arabinosa-Rojo Congo previamente preparadas, y se incuban por 24 a 37°C, todo lo anterior con el fin de obtener colonias aisladas de Rhizobium Etli.

Para la preparación del medio:
Reactivos. 

20 g de agar con Manitol - extracto de levadura y rojo congo” (ELMAC) por L de agua destilada

Agar (para medio solido) (20 g)
1L. de agua destilada.


Materiales: 

Pesa sustancias 1 por cada reactivo.
Cucharas pala 1 por cada reactivo
Matraz de Erlenmeyer de 1L
Tapon de algodón
Parrilla de calentamiento
Agitador magnético
2 cajas petri
1 tubo de ensaye de 30x200
Autoclave

Técnica de estría masiva:

Materiales para técnica de estría masiva (aislamiento) :

· Mechero de Fisher

· Asa bacteriológica

· Inoculo microbiano

· Estufa incubadora

Las cajas petri con agar ELMARC con Arabinosa estériles